Métodos analíticos de microbiología general y aplicada
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Jorge Luna Fontalvo. Métodos analíticos de microbiología general y aplicada
Prólogo
Normas de bioseguridad
Glosario
Elementos y equipos de uso frecuente en el Laboratorio de Microbiología
I. Examen microscópico bacteriano (morfología y tinciones) Introducción
Examen microscópico de microorganismos muertos
Tipos de tinciones
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Preparación del frotis bacteriano (figura 2)
Tinción simple (figura 3)
Tinción de Gram (figura 4)
Tinción de Wirtz (figura 5)
Tinción de Ziehl-Neelsen (figura 6)
Preguntas complementarias
II. Medios de cultivos. Introducción
Clasificación de los medios de cultivos
Objetivo
Materiales
Procedimiento
Preguntas complementarias
III. Métodos de siembra y aislamiento de bacterias. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento
Siembra en medio líquido (figura 10)
Siembra por punción en medio inclinado (figura 11)
Siembra en superficie con rastrillo (figura 12)
Siembra en profundidad (figura 13)
Siembra masiva (figura 14)
Siembra de estrías por agotamiento (figura 15)
Características ópticas
Pigmentación
Los bordes
La elevación
La forma de la colonia
Preguntas complementarias
IV. Efectos de parámetros ambientales en el crecimiento microbiano. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Aerobiosis y anaerobiosis (figura 17)
Temperatura (figura 18)
pH (figura 19)
Presión osmótica (figura 20)
Preguntas complementarias
V. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias. Introducción
Pruebas enzimáticas
Pruebas de fermentación de azúcares
Pruebas IMViC
Producción de amoniaco a partir de urea
Prueba de reducción de nitratos
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Descripción microscópica
Determinación enzimática (figura 21) Catalasa
Coagulasa
Oxidasa
Pruebas de fermentación de azúcares, IMViC, urea y reducción de nitratos (figura 22)
Pauta de identificación bioquímica
Preguntas complementarias
VI. Sensibilidad de bacterias frente a agentes antimicrobianos, antibiograma. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento (figura 27)
Preguntas complementarias
VII. Observación e identificación de hongos. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Observación e identificación de levaduras
Caracterización macroscópica
Caracterización microscópica
Observación e identificación de mohos. Descripción macroscópica
Descripción microscópica
Observación y caracterización de setas (basidiocarpos) Descripción macroscópica
Descripciones microscópicas
Preguntas complementarias
VIII. Interacciones microbianas. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Técnica de Gauze (figura 36)
Técnica de estrías I (figura 37)
Técnica de estrías II (figura 38)
Técnica de enfrentamiento dual hongo-hongo (figura 39)
Preguntas complementarias
IX. Análisis bacteriológico del agua. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Método de tubos múltiples de fermentación (figura 40)
Fase de enriquecimiento
Determinación de coliformes totales
Determinación de coliformes fecales (termotolerantes)
Método del sustrato definido Quanti Tray (figura 41)
Método de filtración por membrana (figura 42)
Preguntas complementarias
X. Comunidades microbianas presentes en el suelo. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Preparación de las diluciones (figura 43)
Recuento directo en placa de las poblaciones microbianas heterótrofas (figura 44)
Recuento de los grupos funcionales microbianos. Bacterias fijadoras de nitrógeno (figura 45)
Recuento de microorganismos celulolíticos, amilolíticos, proteolíticos, amonizantes y desnitrificantes por el método del número más probable NMP (figura 46)
Preguntas complementarias
XI. Análisis microbiológico en alimentos cárnicos. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Preparación de las diluciones (figura 47)
Determinación de microorganismos indicadores de contaminación en alimentos por el método del recuento directo en placa (figuras 48 y 49)
Determinación de bacterias potencialmente patógenas por métodos cualitativos (presencia/ausencia) Determinación de Salmonella (figura 50)
Determinación de V. parahaemolyticus y V. cholerae (figura 51)
Preguntas complementarias
XII. Control microbiológico de manipuladores, ambientes y superficies. Introducción
Análisis microbiológico del aire
Análisis microbiológico de superficie
Análisis microbiológico de manipuladores
Objetivos
Materiales
Procedimiento. Control microbiológico del aire: técnica de sedimentación en placas (figura 52)
Control microbiológico de superficies: método de barrido con hisopo (figura 53)
Control microbiológico en manipuladores: método del hisopo para manos (figura 54)
Método del hisopo para exudados bucofaríngeos (figura 55)
Preguntas complementarias
XIII. Biodegradación de compuestos xenobióticos: caracterización de microorganismos tolerantes a contaminantes químicos. Introducción
Objetivo
Materiales
Procedimiento. Aislamiento de microorganismos tolerantes a plaguicidas (figura 56)
Aislamiento de microorganismos tolerantes a hidrocarburos (figura 57) Fase 1. Preenriquecimiento en MMS con ACPM
Fase 2. Segundo pase en MMS con ACPM
Fase 3. Tercer pase en MMS con ACPM
Fase 4. Siembra en agar nutritivo (AN)
Fase 5. Siembra en agar MMS suplementado con ACPM
Preguntas complementarias
Bibliografía
Отрывок из книги
El presente documento es una versión mejorada y ampliada del Manual de prácticas de laboratorio: microbiología general y aplicada (2012), la cual incorpora nuevas unidades temáticas y la descripción gráfica de cada uno de los procedimientos abordados.
El texto de Métodos analíticos de microbiología general y aplicada es la herramienta de trabajo de laboratorio de las asignaturas de Microbiología General, Microbiología Agrícola, Microbiología Ambiental y Microbiología de Alimentos que se imparten en los programas académicos de Biología, Ingeniería Agronómica, Ingeniería Ambiental y Sanitaria e Ingeniería Pesquera de la Universidad del Magdalena.
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—Terminada la observación, elimine las preparaciones en la bandeja.
Figura 3. Procedimientos básicos para la tinción simple.
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