Métodos analíticos de microbiología general y aplicada

Métodos analíticos de microbiología general y aplicada
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Описание книги

El presente texto permitirá a los estudiantes afianzar los conceptos básicos sobre la vida y funcionalidad de los microorganismos. En él encontrarán la caracterización morfo-fisiológica de las bacterias, la morfología de los hongos y algunas técnicas de control microbiológico ambiental y control microbiológico de alimentos. El libro está concebido como material de apoyo para asignaturas relacionadas con la microbiología, de tal manera que permita a los estudiantes desarrollar conocimientos y adquirir destrezas en el análisis microbiológico, capacidades útiles en el ejercicio profesional e investigativo

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Jorge Luna Fontalvo. Métodos analíticos de microbiología general y aplicada

Prólogo

Normas de bioseguridad

Glosario

Elementos y equipos de uso frecuente en el Laboratorio de Microbiología

I. Examen microscópico bacteriano (morfología y tinciones) Introducción

Examen microscópico de microorganismos muertos

Tipos de tinciones

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Preparación del frotis bacteriano (figura 2)

Tinción simple (figura 3)

Tinción de Gram (figura 4)

Tinción de Wirtz (figura 5)

Tinción de Ziehl-Neelsen (figura 6)

Preguntas complementarias

II. Medios de cultivos. Introducción

Clasificación de los medios de cultivos

Objetivo

Materiales

Procedimiento

Preguntas complementarias

III. Métodos de siembra y aislamiento de bacterias. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento

Siembra en medio líquido (figura 10)

Siembra por punción en medio inclinado (figura 11)

Siembra en superficie con rastrillo (figura 12)

Siembra en profundidad (figura 13)

Siembra masiva (figura 14)

Siembra de estrías por agotamiento (figura 15)

Características ópticas

Pigmentación

Los bordes

La elevación

La forma de la colonia

Preguntas complementarias

IV. Efectos de parámetros ambientales en el crecimiento microbiano. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Aerobiosis y anaerobiosis (figura 17)

Temperatura (figura 18)

pH (figura 19)

Presión osmótica (figura 20)

Preguntas complementarias

V. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias. Introducción

Pruebas enzimáticas

Pruebas de fermentación de azúcares

Pruebas IMViC

Producción de amoniaco a partir de urea

Prueba de reducción de nitratos

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Descripción microscópica

Determinación enzimática (figura 21) Catalasa

Coagulasa

Oxidasa

Pruebas de fermentación de azúcares, IMViC, urea y reducción de nitratos (figura 22)

Pauta de identificación bioquímica

Preguntas complementarias

VI. Sensibilidad de bacterias frente a agentes antimicrobianos, antibiograma. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento (figura 27)

Preguntas complementarias

VII. Observación e identificación de hongos. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Observación e identificación de levaduras

Caracterización macroscópica

Caracterización microscópica

Observación e identificación de mohos. Descripción macroscópica

Descripción microscópica

Observación y caracterización de setas (basidiocarpos) Descripción macroscópica

Descripciones microscópicas

Preguntas complementarias

VIII. Interacciones microbianas. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Técnica de Gauze (figura 36)

Técnica de estrías I (figura 37)

Técnica de estrías II (figura 38)

Técnica de enfrentamiento dual hongo-hongo (figura 39)

Preguntas complementarias

IX. Análisis bacteriológico del agua. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Método de tubos múltiples de fermentación (figura 40)

Fase de enriquecimiento

Determinación de coliformes totales

Determinación de coliformes fecales (termotolerantes)

Método del sustrato definido Quanti Tray (figura 41)

Método de filtración por membrana (figura 42)

Preguntas complementarias

X. Comunidades microbianas presentes en el suelo. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Preparación de las diluciones (figura 43)

Recuento directo en placa de las poblaciones microbianas heterótrofas (figura 44)

Recuento de los grupos funcionales microbianos. Bacterias fijadoras de nitrógeno (figura 45)

Recuento de microorganismos celulolíticos, amilolíticos, proteolíticos, amonizantes y desnitrificantes por el método del número más probable NMP (figura 46)

Preguntas complementarias

XI. Análisis microbiológico en alimentos cárnicos. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Preparación de las diluciones (figura 47)

Determinación de microorganismos indicadores de contaminación en alimentos por el método del recuento directo en placa (figuras 48 y 49)

Determinación de bacterias potencialmente patógenas por métodos cualitativos (presencia/ausencia) Determinación de Salmonella (figura 50)

Determinación de V. parahaemolyticus y V. cholerae (figura 51)

Preguntas complementarias

XII. Control microbiológico de manipuladores, ambientes y superficies. Introducción

Análisis microbiológico del aire

Análisis microbiológico de superficie

Análisis microbiológico de manipuladores

Objetivos

Materiales

Procedimiento. Control microbiológico del aire: técnica de sedimentación en placas (figura 52)

Control microbiológico de superficies: método de barrido con hisopo (figura 53)

Control microbiológico en manipuladores: método del hisopo para manos (figura 54)

Método del hisopo para exudados bucofaríngeos (figura 55)

Preguntas complementarias

XIII. Biodegradación de compuestos xenobióticos: caracterización de microorganismos tolerantes a contaminantes químicos. Introducción

Objetivo

Materiales

Procedimiento. Aislamiento de microorganismos tolerantes a plaguicidas (figura 56)

Aislamiento de microorganismos tolerantes a hidrocarburos (figura 57) Fase 1. Preenriquecimiento en MMS con ACPM

Fase 2. Segundo pase en MMS con ACPM

Fase 3. Tercer pase en MMS con ACPM

Fase 4. Siembra en agar nutritivo (AN)

Fase 5. Siembra en agar MMS suplementado con ACPM

Preguntas complementarias

Bibliografía

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El presente documento es una versión mejorada y ampliada del Manual de prácticas de laboratorio: microbiología general y aplicada (2012), la cual incorpora nuevas unidades temáticas y la descripción gráfica de cada uno de los procedimientos abordados.

El texto de Métodos analíticos de microbiología general y aplicada es la herramienta de trabajo de laboratorio de las asignaturas de Microbiología General, Microbiología Agrícola, Microbiología Ambiental y Microbiología de Alimentos que se imparten en los programas académicos de Biología, Ingeniería Agronómica, Ingeniería Ambiental y Sanitaria e Ingeniería Pesquera de la Universidad del Magdalena.

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—Terminada la observación, elimine las preparaciones en la bandeja.

Figura 3. Procedimientos básicos para la tinción simple.

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