Читать книгу Cultivando conocimiento - Liliana Garzón Forero - Страница 40

La Vibrio fischeri es una bacteria marina luminiscente, heterótrofa gramnegativa. Cuando las condiciones ambientales son óptimas, esta emite una luz de un tono amarillo anaranjado, que puede durar hasta dos semanas. Pertenece a la familia Vibrionaceae, cuya característica más representativa es precisamente la bioluminiscencia. Ha sido empleada en estos ensayos desde hace unos cuarenta años en la determinación de toxicidad en agua y suelo. Cabe destacar, particularmente, la gran sensibilidad que presenta esta bacteria a una amplia variedad de sustancias tóxicas. La reacción de bioluminiscencia está ligada a la respiración celular y es indicativa del estado metabólico de la célula, de modo tal que cuando se presenta una disminución de la bioluminiscencia, se interpreta como una disminución de la respiración celular (Pica y Trujillo, 2008).

Las diferentes clases de contaminantes afectan la respiración celular; a su vez, alteran el porcentaje de síntesis de proteínas y lípidos, lo cual conduce a una disminución en los niveles de emisión de la luminiscencia propia de la bacteria. Lo anterior quiere decir que la reducción de la luz que emite la Vibrio fischeri es directamente proporcional al contenido tóxico de la muestra problema que se tenga como objeto de estudio (Delocado et al., 2008).

El método Biofix precisamente se basa en la medición de la luminiscencia que pueda emitir la bacteria Vibrio fischeri ante la exposición a una sustancia aparentemente de carácter tóxico. A medida que aumentan los niveles de toxicidad encontrados en la muestra problema, la luminiscencia disminuirá proporcionalmente (Pica y Trujillo, 2008).

Para medir la luminiscencia emitida por la bacteria, se emplea un luminómetro que se encarga de detectar y cuantificar los fotones obtenidos de la reacción entre el ATP de las células y las enzimas del reactivo. Se asume, por lo tanto, que la disminución en la capacidad de generar luz se produce por el efecto de la muestra; indica el grado de toxicidad de la muestra. La comparación que dará como resultado el grado de toxicidad se realizará, entonces, con la medición de la luz generada por la bacteria antes de entrar en contacto con alguna sustancia tóxica y después de haber estado expuesta a la muestra problema durante un periodo de incubación de alrededor treinta minutos a una temperatura mayor o igual a 15 °C (Manual Biofix, 2009).